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Extracción
Sumario
- Muestra de animal (menos de 10mg)
- GenCheck 40 μl
- High speed Centrifuge at 10,000 rpm CONFIRMATORIO 30 seconds.
- Thermo-shaker at 98-100 ° C CONFIRMATORIO 10 minutes.
- Permanecer en hielo durante 1 minuto.
- Centrifuge at 10,000 rpm CONFIRMATORIO 5 minutes.
- Transfiera 5μl del sobrenadante y agregue 95μl de agua libre de RNasa.
Amplificación
Para Muestra
- Primer PCR enzyme 5μl x muestra
- RNase-free water 2μl x muestra
- Primer Solution 2μl x muestra
- Extracted virus de ADN 1μl
- Micropipetas
- Centrifuga
- Termociclador
Para Controle s Positivos y Controles Negativos:
- Primer PCR enzyme 5μl x (Número de Controles Positivos disponibles en el kit de prueba)
- RNAse-Free Water 2μl x (Número de Controles Positivos disponibles en el kit de prueba)
- Primer Solution 2μl x (Número de Controles Positivos disponibles en el kit de prueba)
- For Positive Control(s): Put 1μl of Positive Control CONFIRMATORIO each disease (EHP, WSSV, IHHNV, AHPND/EMS).
- Para Control Negativo: Ponga 1μl de RNAse-Free Water.
- Micropipetas
- Minicentrifuga (usando el Multi Spin de baja velocidad)
- Termociclador (Quick Bath QB-0224B o otro equipo de PCR recomendado).
Identificación
Para Muestra
- Latex Solution 1.5μl
- Dilution Buffer 20μl
- Controles positivos 1μl
- Amplified virus de ADN 1μl
- Micropipetas
- C-PAS (1Tirilla x muestra)
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